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江蘇普羅賽生物技術有限公司
哺乳動物細胞表達技術服務
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貨號.: AZ-s003

表達體系描述:
哺乳動物細胞能夠識別和去除基因中的內含子,具備蛋白折疊和翻譯后修飾的功能,對翻譯后的蛋白質可進行加工,因此由哺乳動物細胞表達的外源蛋白質,在生物活性方面遠勝于原核表達系統及酵母、昆蟲細胞等真核表達系統,更接近于天然蛋白質。哺乳動物細胞易被重組的DNA轉染,又可將表達的蛋白質產物分泌到培養基中,方便下游純化,因此利用真核表達系統來表達目的蛋白越來越受到重視。
哺乳動物細胞表達系統技術服務的主要項目如下,詳細信息請與技術支持聯系。

服務項目
表達質粒的構建(目的基因亞克隆)

1, 將客戶提供的基因DNA片段克隆到表達載體中。
2, 大提無內毒素質粒,用于轉染。
3, 為客戶提供正確構建的重組表達質粒5 μg;含該質粒的DH5α甘油菌1 ml;提供陽性克隆質粒酶切或PCR檢測電泳圖;測序報告。
小量轉染及檢測表達(瞬時轉染)
1, 將重組質粒轉入合適的哺乳動物細胞中(293T,293F,CHO)。
2, 通過SDS-PAGE和Western-blot檢測目標蛋白表達情況。
3, 為客戶提供目標蛋白表達結果。
小規模目標蛋白表達及純化
1, 瞬時轉染500ml哺乳動物細胞,收集目的蛋白。
2, 通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化目的蛋白。
3, 通過SDS-PAGE以及Western-blot檢測目的蛋白。
4, 為客戶提供純化好的目的蛋白及純化報告。
大規模目標蛋白表達及純化
根據客戶需求,制備合格的目的蛋白及服務報告。


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